国产精华AV午夜在线,久久午夜无码免费,国精产品999国精产品官网,久久久无码人妻精品无码

人表皮生長因子受體2基因擴增檢測試劑盒（熒光原位雜交法）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對人表皮生長因子受體2基因擴增檢測試劑盒（熒光原位雜交法）注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對人表皮生長因子受體2基因擴增檢測試劑盒（熒光原位雜交法）的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、范圍

人表皮生長因子受體2（Human Epidermal growth factor Receptor 2，HER2）基因定位于染色體17q12，是表皮生長因子受體（EGFR）的成員之一，HER2基因編碼分子量為185kDa的酪氨酸激酶活性跨膜糖蛋白。HER2蛋白主要通過與家族中其他成員形成異二聚體而與各自的配體結(jié)合；當(dāng)異二聚體與配體結(jié)合后，激活酪氨酸激酶的活性。參與細胞的增殖、凋亡調(diào)控、血管和淋巴管新生等生物學(xué)功能。HER2蛋白的過表達主要是由于HER2基因的擴增，可導(dǎo)致腫瘤細胞內(nèi)信號通路的異?；罨?，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)。HER2基因的擴增和蛋白的過表達均可稱為HER2陽性，該情況出現(xiàn)于部分原發(fā)性浸潤性乳腺癌、胃及胃和食管交界處癌（以下統(tǒng)稱胃癌）等患者中。

對于浸潤性乳腺癌適應(yīng)癥，HER2陽性是指免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry，IHC）檢測結(jié)果為（3+），或原位雜交方法（In situ Hybridization，ISH）檢測結(jié)果為基因擴增。而IHC檢測結(jié)果為（2+）的病例為不確定，需進一步應(yīng)用原位雜交方法進行HER2擴增狀態(tài)的檢測。對于胃癌適應(yīng)癥，HER2陽性是指IHC檢測結(jié)果為HER2（2+）的同時ISH檢測結(jié)果為基因擴增，或IHC檢測結(jié)果為HER2（3+）。

對HER2陽性的乳腺癌和胃癌患者進行聯(lián)合抗HER2靶向治療（如抗HER2單克隆抗體、小分子酪氨酸激酶抑制劑等）使得部分患者的生存狀況得到改善，但是在HER2陰性的患者中沒有效果。準(zhǔn)確地檢測HER2蛋白表達和基因擴增狀態(tài)是抗HER2單克隆抗體分子靶向治療患者篩選和療效預(yù)測的前提，對乳腺癌和胃癌的臨床治療和/或預(yù)后判斷至關(guān)重要。對于浸潤性乳腺癌適應(yīng)癥，HER2是患者重要的預(yù)后指標(biāo)，也是抗HER2藥物治療的主要預(yù)測指標(biāo)。對于胃癌適應(yīng)癥，HER2是晚期胃癌的療效預(yù)測標(biāo)志物。

本指導(dǎo)原則適用于采用熒光原位雜交方法檢測手術(shù)切除樣本和活檢樣本的組織切片中的HER2基因擴增情況，包括HER2基因平均拷貝數(shù)（單信號）、HER2基因平均拷貝數(shù)和該基因所在的第17號染色體著絲粒（CEP17）序列平均拷貝數(shù)的比值（雙信號）。對于其他應(yīng)用亮視野原位雜交法檢測HER2基因擴增水平的方法，如顯色原位雜交法（Chromogenic In Situ Hybridization，CISH）和銀增強原位雜交法（Silver—enhanced In Situ Hybridization，SISH），可能部分要求不完全適用或本文所述技術(shù)指標(biāo)不夠全面，申請人可以根據(jù)產(chǎn)品特性對不適用部分進行修訂或補充其他的評價和驗證資料，但需闡述不適用的理由，并驗證替代方法的科學(xué)合理性。

本指導(dǎo)原則適用于進行首次注冊申報和相關(guān)許可事項變更的產(chǎn)品。其他未盡事宜（包括產(chǎn)品風(fēng)險分析資料等），應(yīng)當(dāng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號，以下簡稱《辦法》）等相關(guān)法規(guī)要求。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

綜述資料的撰寫應(yīng)符合《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）（以下簡稱2014年第44號公告）的相關(guān)要求。內(nèi)容主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價以及同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準(zhǔn)上市的情況介紹等內(nèi)容。重點內(nèi)容要求如下：

1.預(yù)期用途：HER2基因及其家族簡介，在相關(guān)適應(yīng)癥中的表達情況，與組織病理學(xué)特征的關(guān)系，其擴增情況與乳腺癌和胃癌治療方案制定以及預(yù)后判斷的關(guān)系等。

2.產(chǎn)品描述：熒光原位雜交法（Fluorescence In Situ Hybridization，F(xiàn)ISH）的技術(shù)原理，目標(biāo)基因的座位區(qū)域，探針的設(shè)計原則以及標(biāo)記的熒光染料，細胞核復(fù)染方式，以及結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)和統(tǒng)計方式等。

3.同類產(chǎn)品上市情況：與相同或相似方法學(xué)（如IHC、其他原位雜交方法等）的產(chǎn)品在性能、上市情況和結(jié)果判讀等方面的比較。

（二）主要原材料研究資料

申請人應(yīng)驗證主要原材料的性能指標(biāo)符合產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)和檢驗要求，以確定設(shè)計要求或者外購廠家，并制定主要原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1.探針：根據(jù)不同用途，分為基因特異性探針（HER2）和著絲粒探針（CEP17）兩種類型。探針可選擇細菌人工染色體（BAC）克隆或者聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）等方法進行制備。下述內(nèi)容是對于探針制備通用要求的舉例，如有其他替代方法，應(yīng)詳細闡述其科學(xué)合理性。

1.1基因特異性探針

1.1.1探針序列的確定：包括探針?biāo)诨虻奈恢脜^(qū)域，人類基因組文庫的篩選、比對和特征確認過程。

1.1.2人類基因組文庫克隆的鑒定：一般檢測與基因區(qū)域相關(guān)的序列標(biāo)記位點（STS）的存在情況，包括引物的設(shè)計，PCR過程和產(chǎn)物的電泳圖譜。

1.1.3探針的標(biāo)記：一般為酶促反應(yīng)或者化學(xué)合成方法，應(yīng)詳述標(biāo)記方式的選擇、反應(yīng)體系和過程、產(chǎn)物的純化方式等。

1.2著絲粒探針：包括微衛(wèi)星重復(fù)單元的序列，PCR引物的設(shè)計和選擇，熒光染料標(biāo)記的反應(yīng)體系、過程和產(chǎn)物的純化方式等。

1.3探針的質(zhì)量控制：性能指標(biāo)一般包括濃度、純度、Tm值（如適用）、雜交效率、特異性等，可使用測定260nm處紫外吸收峰值、測定260nm與280nm處紫外吸收峰值的比值、瓊脂糖凝膠電泳、染色體分散良好的中期相分裂細胞雜交驗證等方式。

2.熒光染料：技術(shù)指標(biāo)包括最大發(fā)射/吸收峰，與目的核酸片段的結(jié)合能力，持續(xù)被激發(fā)光源照射時的抗淬滅能力等。

3.雜交緩沖液：應(yīng)描述組成配方，說明各成分的作用。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括pH值、鹽離子濃度、甲酰胺濃度、硫酸葡聚糖濃度等。

4.人Cot-1 DNA（如適用）：是由大量人類基因組重復(fù)序列組成的高濃度DNA，能封閉樣品中的DNA重復(fù)序列，降低檢測背景。要求能有效封閉背景信號，避免由于非特異性雜交而影響檢測結(jié)果的判讀。應(yīng)評價人Cot-1 DNA對樣本檢測背景信號的封閉效果，方法可選擇通過觀察背景強度以及非特異雜交的強度而確定人 Cot-1 DNA的用量。如有其他清除背景信號的方法，應(yīng)充分說明其科學(xué)合理性。

5.二脒基苯基吲哚（DAPI）復(fù)染劑：評價指標(biāo)包括對細胞核的染色能力以及抗淬滅能力等。

6.企業(yè)參考品：應(yīng)包含陰性參考品、陽性參考品和特異性參考品，并詳細說明參考品的來源、組成、制備和保存情況。陽性參考品可選擇經(jīng)已上市產(chǎn)品確認HER2基因擴增的乳腺浸潤癌/胃癌組織，或者人乳腺癌/胃癌細胞株。陰性參考品可選擇經(jīng)已上市產(chǎn)品確認HER2基因無擴增的腫瘤組織，或者腫瘤細胞株。特異性參考品可選擇健康人外周血培養(yǎng)細胞，應(yīng)含有較多染色體分散良好的中期分裂相淋巴細胞。

7.質(zhì)控片（如有）：可作為試劑盒的組分或者單獨配置，包含陰性質(zhì)控片、臨界值質(zhì)控片和/或陽性質(zhì)控片?？蛇x擇臨床組織樣本或者HER2擴增狀態(tài)確定的細胞株。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料

申請人應(yīng)描述主要生產(chǎn)工藝及確定依據(jù)，詳述工序流程以及各個步驟的質(zhì)量關(guān)鍵控制點。

申請人應(yīng)建立適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)體系，以平衡最佳檢測信號和背景強度的關(guān)系。反應(yīng)過程包括樣本預(yù)處理和雜交檢測兩個步驟，其中樣本預(yù)處理過程一般包括樣本脫蠟、樣本預(yù)處理、蛋白酶處理三個環(huán)節(jié)，雜交檢測過程一般包括變性、雜交、雜交后洗滌、DAPI復(fù)染四個環(huán)節(jié)。另外，應(yīng)合理控制樣本的質(zhì)量并明確要求。

1.樣本的采集、固定、制片、保存和運輸：應(yīng)對采樣部位及方法、樣本中腫瘤組織的含量、離體到固定的溫度及時間、固定溫度及時間、保存和運輸?shù)臈l件和時間進行研究或者驗證，結(jié)合組織形態(tài)及病理學(xué)特征，保證樣本的準(zhǔn)確性以及其中DNA的完整性。另外，切片質(zhì)量對檢測結(jié)果的判讀十分重要，應(yīng)對切片厚度進行研究或者驗證，要求計數(shù)區(qū)域的細胞胞核邊界完整、DAPI染色均一、細胞核無重疊、熒光信號清晰。不同類型的樣本應(yīng)分別驗證。具體可參考國際或國內(nèi)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程；如與標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程有差異，應(yīng)進行充分研究。

2.樣本預(yù)處理：應(yīng)對脫蠟條件、預(yù)處理溫度及時間、特定鹽溶液的離子強度、蛋白酶的消化條件進行充分研究，以避免處理過程中組織和DNA的損失造成檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性。如其中預(yù)處理過程可選擇多個溫度/時間的組合，蛋白酶消化過程可選擇多個持續(xù)時間進行研究。溫度/時間的組合是指首先在同一時期的幾個不同溫度下進行，然后在優(yōu)化溫度條件下的幾個不同持續(xù)時間進行。

3.樣本變性條件：應(yīng)對樣本變性處理的溫度、持續(xù)時間的組合進行充分研究，以保證樣本中DNA雙鏈的充分解鏈，有利于后續(xù)探針和樣本的結(jié)合，提高雜交效率以及保證雜交的特異性。如選擇多個溫度/時間的組合進行研究。

4.樣本雜交條件：應(yīng)對樣本雜交步驟的溫度、持續(xù)時間的組合進行充分研究，以達到探針和樣本的最佳結(jié)合效率。如選擇多個溫度/時間的組合進行研究。

5.雜交后洗滌條件：應(yīng)對緩沖液的鹽濃度和去垢劑成分，以及清洗溫度、時間、次數(shù)的組合進行充分研究，以達到最佳的雜交嚴(yán)格度。要求盡可能去除樣本中的核蛋白等干擾物質(zhì)，避免非特異性雜交，降低背景干擾，并且增加目標(biāo)信號的強度。如選擇多個緩沖液濃度以及多個清洗條件的組合進行研究。

（四）分析性能評估資料

申請人應(yīng)使用多批產(chǎn)品進行研究，建立穩(wěn)定可靠的性能指標(biāo)。需提交在產(chǎn)品研制和成品驗證階段對試劑盒進行的所有性能評價的研究資料，包括方案設(shè)計、研究方法、材料和設(shè)備、驗收標(biāo)準(zhǔn)、試驗數(shù)據(jù)（包括代表性彩色圖片）和結(jié)果統(tǒng)計分析等詳細資料。建議著重對以下性能指標(biāo)進行研究：

1.靈敏度

主要反映產(chǎn)品檢測時探針與目標(biāo)基因位點的結(jié)合效率，也稱為雜交效率。由于組織固定時蛋白質(zhì)和核酸產(chǎn)生的分子間交聯(lián)等對靶核酸具有屏蔽作用，探針穿透細胞的能力不同，導(dǎo)致產(chǎn)品對于不同類型樣本的雜交效率存在性能差異；應(yīng)使用臨床應(yīng)用環(huán)境中所有可能的樣本類型中具有代表性的類型進行評估。方法可選擇20個乳腺浸潤癌/胃癌病例的組織樣本，以及20個癌旁正常組織或者良性疾病組織樣本；對同樣數(shù)量的細胞隨機進行分析計數(shù)。每例組織樣本應(yīng)至少檢測20個細胞，分析統(tǒng)計HER2基因熒光信號數(shù)量，或者同時顯示HER2基因位點標(biāo)記和第17號染色體著絲粒（CEP17）位點標(biāo)記的熒光信號的細胞占全部細胞的比例。

2.特異性

主要反映HER2和CEP17探針對目標(biāo)序列識別的特異性。建議使用中期分裂相的外周血淋巴細胞進行涂片分析。選擇5份以上正常人的外周血培養(yǎng)細胞涂片樣本，每例樣本應(yīng)至少檢測20個染色體分散良好的中期分裂相細胞，對至少200個靶位點進行分析計數(shù)；結(jié)合染色體G顯帶分析，統(tǒng)計細胞核染色體上正確位點的雜交信號占全部雜交信號的比例。應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)的細胞遺傳學(xué)技術(shù)識別信號位點，例如染色體形態(tài)學(xué)分析、染色體區(qū)段染色、反向DAPI條帶等技術(shù)；考察在HER2基因位點（17q11.2-q12）和/或第17號染色體著絲粒位點（17q11.2-q11.1）的特定熒光信號占全部熒光信號的比例。

3.陰、陽性符合率

主要反映產(chǎn)品對不同類型樣本中HER2基因的檢出能力和準(zhǔn)確性。應(yīng)使用臨床應(yīng)用環(huán)境中所有可能的樣本類型中具有代表性的組織類型進行評價，并提供樣本來源、唯一可溯源編號、病理組織類型，以及明確的HER2基因擴增狀態(tài)。對于適應(yīng)癥為乳腺癌的情況，用于評價的樣本類型應(yīng)包括乳腺浸潤性癌非特殊類型、乳腺浸潤性小葉癌、小管癌、粘液癌，良性疾?。ㄈ缦俨〖袄w維腺瘤）以及正常乳腺組織等。對于適應(yīng)癥為胃癌的情況，用于評價的樣本類型應(yīng)包括腸型、彌漫型、混合型（Lauren分型）胃癌，良性疾?。ㄈ缥刚衬ぢ匝装Y）以及正常胃組織等。每種組織類型設(shè)置2至3例樣本進行評價。建議著重評價申報產(chǎn)品對IHC檢測結(jié)果為HER2（2+）樣本的HER2基因擴增狀態(tài)的檢測能力。

4.精密度

申請人應(yīng)充分考慮到配套檢測系統(tǒng)以及使用環(huán)境的因素：包括熒光顯微鏡的特征、激發(fā)光源及過濾器的性能參數(shù)、物鏡放大倍數(shù)等，以及不同時間、地點、操作人員、檢測次數(shù)對結(jié)果判讀的影響；對可能導(dǎo)致檢測之間差異的主要變量進行驗證。用于精密度評價的參考品應(yīng)選擇HER2擴增、HER2無擴增以及臨界值的連續(xù)切片組織樣本。其中臨界值樣本和成簇擴增的樣本應(yīng)分別設(shè)置驗收標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)差以及變異系數(shù)的范圍）。建議參考下述方法進行各個指標(biāo)的評價：

4.1批內(nèi)精密度：由同一操作人員使用同一批次產(chǎn)品進行檢測，每例樣本重復(fù)檢測多次，對結(jié)果判讀的一致性進行統(tǒng)計分析。

4.2批間精密度：由同一操作人員使用多個批次產(chǎn)品進行檢測，每例樣本重復(fù)檢測多次，對結(jié)果判讀的一致性進行分析統(tǒng)計。

4.3日間精密度：在多個不同日期，由同一操作人員使用同一批次產(chǎn)品進行檢測，對結(jié)果判讀的一致性進行統(tǒng)計分析。

4.4人員間精密度：由數(shù)位操作人員使用同一批次產(chǎn)品進行檢測，每份樣本由數(shù)位閱片人員進行獨立結(jié)果判讀。對不同操作人員/閱片人員對同一例組織樣本檢驗方法以及結(jié)果判讀的一致性進行分析統(tǒng)計。

4.5室間精密度：建議申請人選擇不同的實驗室進行檢測間一致性的評價。

（五）陽性判斷值確定資料

HER2檢測結(jié)果的判讀標(biāo)準(zhǔn)不斷進行著更新，申請人應(yīng)參考最新版臨床指南性文件建立陽性判斷值。應(yīng)提交申報產(chǎn)品判讀規(guī)則以及預(yù)設(shè)陽性判斷值所依據(jù)的文獻資料，并采用具有統(tǒng)計學(xué)意義數(shù)量的樣本對判讀規(guī)則以及預(yù)設(shè)陽性判斷值進行驗證。應(yīng)包含HER2擴增、HER2無擴增以及一定數(shù)量的臨界值（陽性判斷值附近）組織樣本，包括HER2/CEP17熒光信號總數(shù)比值在2附近（1.8～2.2），或者每個細胞的平均HER2拷貝數(shù)在4～6附近的樣本。

首先設(shè)定檢測結(jié)果重復(fù)性較好的目標(biāo)，即HER2平均拷貝數(shù)或者HER2平均拷貝數(shù)/CEP17平均拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)差/變異系數(shù)范圍驗收標(biāo)準(zhǔn)，確定初始統(tǒng)計細胞區(qū)域和數(shù)量，并在結(jié)果不確定時納入更多區(qū)域或數(shù)量進行統(tǒng)計。

然后建議參照組織病理學(xué)特征或者IHC結(jié)果確定可能存在擴增的浸潤性乳腺癌/胃癌區(qū)域，選擇細胞核大小一致、胞核邊界完整、DAPI染色均一、細胞核無重疊、熒光信號清晰的細胞，隨機計數(shù)2個區(qū)域中的至少20個細胞，并對結(jié)果進行統(tǒng)計分析。

（六）穩(wěn)定性研究資料

根據(jù)本產(chǎn)品特性，申請人應(yīng)分別從實時穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、開瓶/凍融穩(wěn)定性，以及使用過程中的雜交后信號穩(wěn)定性、探針的光照穩(wěn)定性等方面對產(chǎn)品的穩(wěn)定性進行研究，充分考慮在實際的運輸、保存和使用條件下對產(chǎn)品性能的影響。其中使用過程穩(wěn)定性應(yīng)評價在實際使用的實驗室環(huán)境條件下，不同的光照條件對熒光標(biāo)記探針以及雜交后樣本熒光信號強度的影響，注意應(yīng)覆蓋檢測的全過程。評價指標(biāo)應(yīng)至少包括靈敏度、特異性以及熒光信號強度。

樣本中核酸的完整性對于結(jié)果的正確判讀也十分關(guān)鍵。申請人應(yīng)充分考慮臨床樣本采集、處理、運輸、儲存與切片制備等各個階段的條件，如溫度、濕度對樣本質(zhì)量的影響，全面評價臨床樣本、質(zhì)控品和企業(yè)參考品的穩(wěn)定性。樣本穩(wěn)定性應(yīng)分別評價石蠟包埋組織塊與組織切片的穩(wěn)定性，評價指標(biāo)應(yīng)至少包括儲存溫度及時間。

（七）臨床評價資料

臨床試驗總體要求及臨床試驗資料的內(nèi)容應(yīng)符合《辦法》、2014年第44號公告和《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的規(guī)定，以下僅結(jié)合人表皮生長因子受體2基因擴增檢測試劑盒（熒光原位雜交法）的具體特點對其臨床試驗中應(yīng)重點關(guān)注的內(nèi)容進行闡述。

1.臨床試驗機構(gòu)及人員的要求

申請人應(yīng)當(dāng)選定不少于3家（含3家）已備案的醫(yī)療器械臨床試驗機構(gòu)，按照有關(guān)規(guī)定開展臨床試驗。申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點及其預(yù)期用途，綜合不同地區(qū)人種、流行病學(xué)背景等因素選擇臨床試驗機構(gòu)。臨床試驗機構(gòu)必須具有與申報試劑相適應(yīng)的專業(yè)技術(shù)人員及儀器設(shè)備，并能夠確保該項試驗的實施。

2.試驗方案

2.1各臨床試驗機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應(yīng)在臨床試驗機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，需強調(diào)組織標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)采樣、及時在10%中性緩沖福爾馬林溶液中充分固定及其他標(biāo)準(zhǔn)操作程序。申報單位的技術(shù)人員除進行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉試驗進程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

2.2以圖表的形式對試驗總體設(shè)計及工作流程進行描述，圖表中應(yīng)包括連續(xù)切片的數(shù)量及用途分配等。各臨床試驗機構(gòu)選用的對比試劑應(yīng)保持一致，以便進行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。

2.3試驗方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除選擇標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床試驗都應(yīng)記錄在案，并明確說明原因。

2.4試驗方案中應(yīng)明確閱片者、操作者的選擇標(biāo)準(zhǔn)。閱片者應(yīng)選擇在免疫組織化學(xué)、熒光原位雜交技術(shù)應(yīng)用和乳腺癌/胃癌病理診斷中有豐富經(jīng)驗的醫(yī)學(xué)工作者。

2.5在試驗操作過程中和判定檢測結(jié)果時應(yīng)采用盲法以保證試驗結(jié)果的客觀性。臨床試驗研究方案中應(yīng)詳述盲法的具體操作流程。

2.6臨床試驗前申請人應(yīng)對臨床試驗機構(gòu)參與人員進行相關(guān)技術(shù)培訓(xùn)，并采用統(tǒng)一判讀標(biāo)準(zhǔn)，保持各臨床試驗機構(gòu)的判讀一致性。注意判讀方法與說明書要求一致。

2.7在整個試驗中，試驗用體外診斷試劑和對比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。臨床試驗研究方案中應(yīng)明確質(zhì)控方法及配合用質(zhì)控試劑的詳細信息。

3.試驗方法

3.1“已有同品種批準(zhǔn)上市”產(chǎn)品

應(yīng)選擇已批準(zhǔn)上市，且已經(jīng)充分聯(lián)合藥物進行臨床評價的伴隨診斷試劑作為對比試劑，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。

3.2新產(chǎn)品

用于胃癌等其他用途的此類檢測試劑，如無已上市同類產(chǎn)品，應(yīng)選擇臨床試驗機構(gòu)已建立的參考方法（應(yīng)可報告腫瘤細胞HER2基因平均拷貝數(shù)和腫瘤細胞CEP17平均拷貝數(shù)）為參比方法，進行檢測結(jié)果的一致性研究。該參考方法應(yīng)已經(jīng)充分聯(lián)合藥物進行臨床評價。

3.3對于預(yù)期用途中已明確配合具體治療藥物名稱的檢測試劑，應(yīng)采用聯(lián)合藥物評價臨床試驗的形式，同時評價檢測結(jié)果與接受靶向治療藥物后療效的相關(guān)性和試驗用體外診斷試劑檢測的準(zhǔn)確性。

3.4臨床試驗用樣本的選擇和樣本量

臨床試驗應(yīng)選擇經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林固定的石蠟包埋組織樣本或組織芯片。

應(yīng)根據(jù)設(shè)定的符合率接受標(biāo)準(zhǔn)和選定的統(tǒng)計學(xué)方法分別計算總樣本例數(shù)及IHC檢測結(jié)果為HER2（2+）的樣本例數(shù)。但總樣本例數(shù)不低于1000例。其中IHC檢測結(jié)果為HER2（2+）的樣本不少于400例。如申報試劑聲稱可以用于檢測兩種或兩種以上腫瘤類型，則應(yīng)在一種類型滿足上述要求的基礎(chǔ)上，對每種新增的腫瘤類型進行不少于300例樣本的臨床驗證，IHC檢測結(jié)果為HER2（2+）的樣本不少于120例。樣本的選擇應(yīng)包含臨床預(yù)期使用人群和特異性樣本，注意包含臨床相關(guān)的各種病理組織類型。

對于適應(yīng)癥為浸潤性乳腺癌的情況，樣本應(yīng)包含臨床常見的各種浸潤性乳腺癌病理組織類型，如乳腺浸潤性癌非特殊類型、乳腺浸潤性小葉癌、小管癌、粘液癌。特異性樣本應(yīng)包含腺病及纖維腺瘤。

對于適應(yīng)癥為胃癌的情況，樣本應(yīng)包含臨床常見的各種腺癌病理組織類型，如腸型、彌漫型、混合型（Lauren分型）。特異性樣本應(yīng)包含胃粘膜慢性炎。

4.統(tǒng)計學(xué)分析

4.1對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法。

4.1.1對于本類試劑，常以配對列聯(lián)表的形式總結(jié)兩種試劑的定性檢測結(jié)果，分別計算全部樣本的陽性符合率、陰性符合率和總符合率以及IHC檢測結(jié)果為HER2（2+）樣本的陽性符合率、陰性符合率和總符合率。應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計學(xué)檢驗或推斷方法（如95%置信區(qū)間），給出不確定樣本占全部樣本的比例，并評價其對符合率的影響，以檢驗兩種試劑檢測結(jié)果的一致性。

4.1.2由于此類試劑在臨床結(jié)果的報告中同時報告腫瘤細胞HER2基因平均拷貝數(shù)、腫瘤細胞CEP17平均拷貝數(shù)（雙探針適用）和兩者的比值（雙探針適用），因此還應(yīng)對拷貝數(shù)的準(zhǔn)確性進行評價?？刹捎迷囼炗皿w外診斷試劑（考核試劑）與對比試劑或參考方法檢測結(jié)果的腫瘤細胞HER2基因平均拷貝數(shù)和腫瘤細胞CEP17平均拷貝數(shù)（雙探針適用）做散點圖的方法，配合適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計分析方法，如以線性回歸為基礎(chǔ)的分析方法或Bland-Altman方法等，評價考核試劑與對比試劑對于腫瘤細胞HER2基因平均拷貝數(shù)和腫瘤細胞CEP17平均拷貝數(shù)（雙探針適用）檢測結(jié)果的一致性。

4.2對臨床試驗中人群基本特征進行分析，包括：年齡、性別、病理組織類型、癌癥分期情況、免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果等（見表1）。

表1 人群基本特征統(tǒng)計表

4.3聯(lián)合藥物評價臨床試驗部分

可采用前瞻性或回顧性研究方法，結(jié)合接受藥物治療后的臨床試驗數(shù)據(jù)等，分析檢測結(jié)果。此部分研究通常使用Kaplan Meier曲線等生存數(shù)據(jù)分析方法，選取適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計方法檢驗客觀有效率，評價檢測結(jié)果與用藥后臨床結(jié)局之間的相關(guān)性。樣本數(shù)量應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。

5.結(jié)果差異樣本的驗證

在數(shù)據(jù)收集過程中，對兩種試劑檢測結(jié)果不一致的樣本，應(yīng)采用第三方試劑或其他合理的方法進行復(fù)核，同時結(jié)合組織病理學(xué)特征、免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果等對差異產(chǎn)生原因進行分析。

6.質(zhì)量控制

由于檢測前預(yù)處理步驟較多，導(dǎo)致判讀結(jié)果可能會在試驗人員間、實驗室間產(chǎn)生差異。為了客觀單一評價試劑性能，盡量減少這種人為差異對最終結(jié)果造成的影響，臨床試驗開始前，各臨床試驗機構(gòu)應(yīng)統(tǒng)一操作方法，進行判讀一致性訓(xùn)練及統(tǒng)一的質(zhì)量控制，確保同樣的樣本在不同機構(gòu)之間的判讀結(jié)果保持一致。注意應(yīng)包含IHC以及FISH檢測結(jié)果為陰性、陽性和不確定的樣本。該預(yù)評估內(nèi)容、實現(xiàn)方法、結(jié)果等應(yīng)在臨床試驗報告中體現(xiàn)。

7.原始數(shù)據(jù)

7.1提交病例報告表（Case Report Form，CRF），內(nèi)容應(yīng)至少包括：性別、年齡、標(biāo)本的采集部位、標(biāo)本類型、病理診斷結(jié)果（包含分級）、HE染色結(jié)果、免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果、考核試劑檢測結(jié)果、對比試劑檢測結(jié)果、第三方復(fù)核結(jié)果。所有采用原位雜交法的檢測結(jié)果均應(yīng)包含評估的細胞數(shù)量、HER2基因/CEP17熒光信號比值（雙探針適用）、每個細胞的平均HER2拷貝數(shù)、每個細胞的平均CEP17拷貝數(shù)（雙探針適用）和定性判讀結(jié)果。

7.2提交入選樣本結(jié)果的代表性彩色圖片。

8.臨床試驗總結(jié)報告撰寫

根據(jù)《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，臨床試驗報告應(yīng)對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。建議在臨床試驗總結(jié)報告中對以下內(nèi)容進行詳述：

8.1臨床試驗總體設(shè)計及方案描述

8.1.1臨床試驗的整體管理情況、臨床試驗機構(gòu)選擇、臨床主要試驗人員的選擇、人員簡介等基本情況介紹；

8.1.2病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、標(biāo)本的選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)；

8.1.3樣本類型，樣本的收集、處理及保存等；

8.1.4陰、陽性判讀標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計學(xué)方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)及樣本量確定依據(jù)。

8.2臨床試驗具體情況

8.2.1試驗用體外診斷試劑和對比試劑的名稱、批號、有效期等信息；

8.2.2對各臨床試驗機構(gòu)的病例數(shù)、人群分布情況進行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比；

8.2.3質(zhì)量控制，試驗人員培訓(xùn)、質(zhì)控片的檢測情況，對檢測結(jié)果判讀的抽查結(jié)果評估；

8.2.4具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本保存、結(jié)果不一致樣本的驗證等。

8.3臨床試驗結(jié)果及分析

8.3.1數(shù)據(jù)預(yù)處理、差異結(jié)果的重新檢測或采用其他合理的方法進行復(fù)核及無法評估樣本的處理、試驗過程中是否涉及對方案的修改。

8.3.2結(jié)果的一致性分析

計算陽性符合率、陰性符合率、總體符合率及其95%（或99%）的置信區(qū)間。采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)方法，對定性結(jié)果的檢測一致性和拷貝數(shù)檢測一致性進行評價。采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)方法對聯(lián)合藥物臨床評價部分?jǐn)?shù)據(jù)進行分析評價，研究檢測結(jié)果與用藥后臨床結(jié)局之間的相關(guān)性（如適用）。

8.4討論和結(jié)論

對整體結(jié)果進行總結(jié)性描述并簡要分析試驗結(jié)果，對本次臨床試驗的特別說明（如有），最后得出臨床試驗結(jié)論。

（八）產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、臨床評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)文獻，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求。需符合《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的要求。

產(chǎn)品性能指標(biāo)主要包括：外觀、熒光信號強度、靈敏度、特異性、陽性符合率、陰性符合率等。如果申報試劑已有適用的國家參考品/標(biāo)準(zhǔn)品發(fā)布，則申請人應(yīng)在產(chǎn)品技術(shù)要求中提出檢測要求。另外，產(chǎn)品技術(shù)要求中應(yīng)以附錄形式明確主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品要求，需符合相關(guān)編寫規(guī)范的要求。

（九）產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢測方法及檢測結(jié)果解釋等重要信息，是指導(dǎo)實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢測結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求。

結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，以下詳細說明書的重點內(nèi)容，以指導(dǎo)注冊申報人員更合理地完成說明書編制。

1.【預(yù)期用途】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

1.1試劑盒用于體外定性檢測經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋乳腺癌和/或胃癌組織切片中HER2基因的擴增情況。用于指導(dǎo)乳腺原發(fā)性浸潤癌和/或胃及胃食管結(jié)合部腺癌的藥物治療和/或預(yù)后評估（預(yù)后評估僅乳腺癌適用）。

1.2明確目標(biāo)人群：例如對所有乳腺原發(fā)性浸潤癌原發(fā)灶、復(fù)發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶（如可以獲取到足夠的樣本）所有經(jīng)病理診斷證實為胃及胃食管結(jié)合部腺癌，新輔助治療后病灶及復(fù)發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶（如可以獲取到足夠的樣本）進行檢測。因腫瘤個體化診療研究和發(fā)展不斷深入，該目標(biāo)人群可能隨著個體化治療藥物和試劑的研究和發(fā)展而發(fā)生變化，建議申請人參照最新指南或?qū)＜夜沧R設(shè)定申報產(chǎn)品的目標(biāo)人群。

1.3簡單介紹HER2基因的生物學(xué)特征，如基本結(jié)構(gòu)、編碼蛋白及與腫瘤預(yù)后判斷、用藥指導(dǎo)的關(guān)系。

1.4簡單介紹與IHC檢測之間的關(guān)系。建議說明臨床應(yīng)用過程中首先考慮使用免疫組織化學(xué)方法檢測HER2蛋白的過表達狀態(tài)，在結(jié)果為（2+）的情況下需進一步應(yīng)用原位雜交方法確定HER2基因的擴增狀態(tài)。

1.5如未進行聯(lián)合藥物評價臨床試驗，則不應(yīng)體現(xiàn)具體藥物產(chǎn)品（商品）名稱、生產(chǎn)企業(yè)信息等，并注明該產(chǎn)品未與具體藥物聯(lián)合進行臨床評價。

1.6明確說明該試劑盒僅用于對特定腫瘤患者HER2基因擴增情況的檢測，其檢測結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為患者個體化治療的唯一依據(jù)，臨床醫(yī)生應(yīng)結(jié)合患者病情、藥物適應(yīng)癥、治療反應(yīng)及其他實驗室檢測指標(biāo)等因素對檢測結(jié)果進行綜合判斷。

2.【檢測原理】

簡述熒光原位雜交技術(shù)的基本原理。對特異性結(jié)合靶基因，探針長度、序列設(shè)計、標(biāo)記染料名稱及標(biāo)記方法，預(yù)處理、雜交與復(fù)染過程，熒光信號觀察、計數(shù)和比值計算的方法等內(nèi)容進行介紹。

3.【主要組成成分】

3.1說明試劑盒包含組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息；質(zhì)控片（如有）的組織或細胞株名稱。

3.2對檢測中使用的探針信息進行簡單介紹。

3.3試劑盒中不包含但對該項檢測必需的組分，應(yīng)列出相關(guān)試劑、質(zhì)控片（如適用）的名稱與貨號；耗材的規(guī)格（材質(zhì)）要求；化學(xué)制劑的純度和濃度（如適用）要求及其他相關(guān)信息。

4.【儲存條件及有效期】

對試劑的儲存條件、有效期、開封穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性和凍融次數(shù)限制等信息做詳細介紹。如試劑盒包含質(zhì)控片還應(yīng)在此處明確質(zhì)控片的穩(wěn)定性。

5.【適用儀器】

明確配套適用熒光顯微鏡的配置要求，至少包括對目鏡與物鏡的放大倍率、光源及濾光片要求。對顯微鏡配套耗材（如鏡油）的要求進行介紹。

6.【樣本要求】

重點明確以下內(nèi)容：

6.1對適用樣本的取材、固定、包埋與切片的具體要求。此部分內(nèi)容可參考國際或國內(nèi)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作性文件內(nèi)容進行編寫或引用。注意不同組織類型的樣本應(yīng)分別描述。

6.2樣本的穩(wěn)定性（包括蠟塊與切片）。

7.【檢測方法】

詳細說明操作的各個步驟：

7.1明確檢測需要的儀器與設(shè)備。如烤片機、恒溫箱、水浴鍋、染色缸、雜交盒等。注明貨號及生產(chǎn)商（如需要）。

7.2試劑配制方法、注意事項，試劑開封、配制后使用方法及注意事項等。

7.3對于手工或半自動檢測，詳述脫蠟、煮片、消化、固定、核酸變性、雜交、洗滌和復(fù)染等各操作步驟。描述應(yīng)盡量細化，需明確各步驟處理時間、溫度、注意事項（如避光）等內(nèi)容。

7.4對雜交后載玻片的儲存及穩(wěn)定性、復(fù)染后的儲存及穩(wěn)定性進行說明。

7.5詳細說明質(zhì)量控制情況：

建議實驗室每次檢測設(shè)置內(nèi)對照和外對照（質(zhì)控片），以對整體操作流程進行質(zhì)量控制。評價指標(biāo)應(yīng)包括細胞結(jié)構(gòu)的完整性，探針雜交信號的強度和位點的準(zhǔn)確性，背景熒光強度，可計數(shù)信號（單色/雙色）的細胞占全部細胞的比例等。

7.5.1內(nèi)對照可為癌旁正常組織，明確樣本檢測的內(nèi)對照使用原則，如“75%以上的腫瘤細胞核中都有雜交信號時，視為檢測成功?！?/span>

7.5.2外對照可選擇已知HER2基因擴增狀態(tài)的組織切片或者細胞株，至少包括臨界值以及無擴增樣本。明確每一批次患者樣本檢測和更換使用新的試劑盒批次時，均應(yīng)同時進行質(zhì)控片檢測，以監(jiān)控檢測性能并評估信號計數(shù)的準(zhǔn)確性。分析質(zhì)控結(jié)果不符合要求的原因并詳述處理方式。

如試劑盒內(nèi)不包含質(zhì)控片，應(yīng)明確配套使用的質(zhì)控片信息，可以為商用質(zhì)控片也可以為臨床檢測實驗室自制質(zhì)控片。自制質(zhì)控片應(yīng)為已知FISH結(jié)果的陰性和陽性質(zhì)控片，詳述質(zhì)控片的制備方法。明確質(zhì)控結(jié)果要求（試驗有效性的判斷），結(jié)果允許范圍（如適用于不同的儀器或適用于手工與儀器方法，應(yīng)分別列明結(jié)果的允許范圍）。

7.6建議強調(diào)實驗室檢測相關(guān)的儀器設(shè)備需定期維護、校驗，應(yīng)建立完善的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范文件，從事檢測的技術(shù)人員和病理醫(yī)師應(yīng)通過必要的培訓(xùn)和資格考核，做好記錄和存檔，內(nèi)部定期對不同批次檢測結(jié)果進行重復(fù)性分析；并積極參加相關(guān)的外部質(zhì)控活動。

8.【陽性判斷值】

根據(jù)相關(guān)指南及規(guī)范性文件，以HER2拷貝數(shù)平均值/細胞和/或HER2總拷貝數(shù)與CEP17總拷貝數(shù)的比值（雙信號）的形式明確陽性判斷值。

9.【檢驗結(jié)果的解釋】

9.1從細胞核形態(tài)、探針信號強度、背景情況等多方面，詳述雜交后樣本玻片的有效性評估標(biāo)準(zhǔn)。建議對不符合有效性評估標(biāo)準(zhǔn)情況發(fā)生時的常見問題及解決方法以列表的形式明確。

9.2明確目標(biāo)區(qū)域的確定方法及僅對腫瘤細胞進行計數(shù)的要求；明確細胞計數(shù)的具體方法，包括每個樣本初始讀取細胞數(shù)及結(jié)果不確定樣本的處理方法。明確HER2擴增異質(zhì)性的處理方法。

可以列表的形式詳述信號計數(shù)與陰陽性判定規(guī)則，應(yīng)配合清晰彩圖圖例。例如對于浸潤性乳腺癌，描述為“找到至少2個浸潤癌區(qū)域，隨機計數(shù)至少20個浸潤癌細胞核中的雙色信號，計算信號比值（比值=計數(shù)細胞核中紅色信號總數(shù)/計數(shù)細胞核中綠色信號總數(shù)），根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)對樣本進行HER2基因擴增陰陽性的判斷：比值≥2.0，或者比值<2.0且平均HER2拷貝數(shù)/CEP17拷貝數(shù)≥6.0時為陽性；擴增細胞應(yīng)均質(zhì)、連續(xù)，且占浸潤癌的10％以上。比值<2.0且平均HER2拷貝數(shù)/細胞<4.0時為陰性。HER2/CEPl7比值<2.0且平均HER2拷貝數(shù)/細胞<6.0，但≥4.0時為不確定。對于不確定的樣本，需再計算20個細胞核中的信號，或由另一閱片人重新計數(shù)?！?/span>

10.【檢驗方法的局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進行相關(guān)說明，主要包括以下描述，請申請人選擇適用的條款在產(chǎn)品說明書中予以闡述。

10.1本試劑盒為體外診斷試劑，檢測結(jié)果的臨床判定均應(yīng)結(jié)合患者醫(yī)療病史和其他臨床診斷結(jié)果進行綜合評估，不得作為臨床診治的唯一依據(jù)。

10.2腫瘤組織HER2基因表達的異質(zhì)性可能影響檢測結(jié)果。例如可導(dǎo)致IHC與ISH檢測、原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶、活檢標(biāo)本與手術(shù)切除標(biāo)本的檢測結(jié)果不一致。異質(zhì)性在胃癌中更常見。對于胃鏡活檢標(biāo)本，多點活檢有助于減少腫瘤異質(zhì)性的影響，提高檢測的準(zhǔn)確性。另外，新輔助治療會影響胃癌HER2狀態(tài)，治療前活檢標(biāo)本和治療后手術(shù)標(biāo)本的綜合判斷有助于更好的用藥指導(dǎo)。

10.3本試劑盒檢測結(jié)果受樣本來源、樣本采集過程、樣本質(zhì)量、樣本運輸條件、樣本預(yù)處理等因素影響。同時由于結(jié)果判斷的主觀性，可能導(dǎo)致得出假陽性或假陰性的檢測結(jié)果，使用者應(yīng)了解檢測過程中可能存在的潛在錯誤導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確等局限性。

10.4檢測結(jié)果如與組織病理學(xué)特征不符，應(yīng)核實病理診斷或重新檢測。

10.5本產(chǎn)品的性能指標(biāo)是基于說明書所述檢測程序獲得，對該程序進行更改，可能會改變該檢驗的結(jié)果。

10.6本試劑僅對經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋的組織進行了驗證（如適用），不得用于其他樣本類型或流式細胞檢測等其他用途。

11.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

根據(jù)分析性能評估研究結(jié)果，詳述以下性能指標(biāo)，包括研究方法和評估結(jié)果：

11.1靈敏度：在乳腺浸潤癌/胃癌病例的組織樣本，以及癌旁正常組織或者良性疾病組織樣本中探針與目標(biāo)基因位點的結(jié)合效率。

11.2特異性：HER2和CEP17探針對目標(biāo)序列識別的特異性。

11.3陰、陽性符合率：在不同組織類型中HER2基因的檢出能力和準(zhǔn)確性。

11.4精密度：批內(nèi)、批間精密度及不同時間、地點、檢測系統(tǒng)（如適用）、人員之間的精密度。

11.5臨床試驗數(shù)據(jù)總結(jié)。

12.【注意事項】

12.1有關(guān)試劑盒內(nèi)人源組分（如有）生物安全性的警告。

12.2有關(guān)實驗操作中涉及試劑的安全性提示，包括對有毒有害物質(zhì)的防護及危險物品的處理方法等。

12.3熒光染料在光照條件下容易淬滅。為降低該影響，對所有含熒光探針的溶液，包括雜交后樣本載玻片均應(yīng)盡量避免或者減少在光照條件下保存和處理。

12.4使用校準(zhǔn)過的溫度計測定溶液、水浴槽和溫箱溫度。

三、編寫單位

國家食品藥品監(jiān)督管理總局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心。